大肠杆菌菌体蛋白的提取及检验方法是什么

大肠杆菌菌体蛋白的提取方法大体为培养大肠杆菌、收集菌体、破碎菌体、提取菌体蛋白等。检验方法包括蛋白质浓度的测定、蛋白质纯度的检验、蛋白质免疫印迹法等。

1、菌体蛋白的提取

（1）培养大肠杆菌：将大肠杆菌接种于液体培养基中，在适宜的温度下培养。

（2）收集菌体：当培养物的浓度达到一定程度时，可通过离心或过滤等方法收集菌体。

（3）破碎菌体：将收集到的菌体用超声波破碎仪破碎，或者加入溶菌酶等破碎菌体。

（4）提取菌体蛋白：将破碎后的菌体进行离心分离，收集上清液，即为菌体蛋白溶液。

2、菌体蛋白的检验

（1）蛋白质浓度的测定：采用双缩脲法或考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度。

（2）蛋白质纯度的检验：采用SDS-PAGE电泳法，观察菌体蛋白的电泳图谱，判断是否存在杂蛋白。

（3）蛋白质免疫印迹法：将提取的菌体蛋白进行免疫印迹试验，检测是否存在目标蛋白质。

以上是大肠杆菌菌体蛋白的提取及检验方法，实际操作中需要根据具体情况进行适当调整。