做荧光定量cdna浓度要一致吗

做荧光定量PCR检测时，不同样品组cDNA浓度不必完全一致。如果是绝对定量，需要保证cDNA在标准曲线测得的范围内；如果是相对定量，内参组与待测基因组的cDNA浓度需要一致，每个样品组的内参CT值需大约在13~20之间。

荧光定量PCR是一种对样品DNA进行扩增反应，通过荧光信号测得聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法，通过内参荧光CT值或标准曲线对样品待测DNA进行相对定量或绝对定量分析。临床上常用于各型肝炎、艾滋病、结核等疾病的诊断和疗效评价。

如果检测方法为绝对定量，可由标准曲线拟合的公式直接计算出样本cDNA的拷贝数，不必要求每个样品cDNA浓度一致，但样本cDNA浓度应落在标准曲线所测的范围内，否则计算可能不准确。

相对定量时，因为每个样本有内参作为标准，可算得待测基因的相对定量，因此只需要待测基因组与内参组的cDNA浓度保持一致，同时要求内参CT值大约在13~20之间，以保证PCR检测高效发生。